স্তন্যপায়ী কোষের সংস্কৃতির প্রক্রিয়া
স্তন্যপায়ী কোষগুলি টিস্যু নিষ্কাশন, প্রাথমিক সংস্কৃতি এবং উপসংস্কৃতির প্রক্রিয়ার মধ্য দিয়ে যায়। উপসংস্কৃতিকে শর্ত অনুসারে সেল লাইন কালচার এবং সেল লাইন কালচারে ভাগ করা যায়। প্রতিটি প্রক্রিয়া সংক্ষেপে নিম্নরূপ বর্ণনা করা হয়েছে:
প্রাথমিক সংস্কৃতি: প্রাণী থেকে টিস্যু অপসারণের পরে, এটি কিমা করা হয়, বিভিন্ন এনজাইম (সাধারণত ট্রিপসিন), চেলেটিং এজেন্ট (সাধারণত EDTA) এবং যান্ত্রিক পদ্ধতি (বারবার আকাঙ্ক্ষা এবং পিপেট ফুঁ) দিয়ে চিকিত্সা করা হয় এবং তারপর পৃথক কোষে ছড়িয়ে দেওয়া হয়, চাষ করা হয়। একটি উপযুক্ত মাধ্যম যা কোষকে বেঁচে থাকতে, বৃদ্ধি করতে এবং সংখ্যাবৃদ্ধি করতে সক্ষম করে। প্রাইমারি সেল কালচার বলতে সাধারণত 10 টি প্যাসেজের মধ্যে সেল কালচার বোঝায় একটি প্রাণী থেকে কোষ অপসারণ করার পর।
প্রাথমিক কোষ সংস্কৃতি, কোষ বিভাজন এবং প্রজননের পরে, সংস্কৃতি ধীরে ধীরে বৃদ্ধি পায়, বৃদ্ধি সংস্কৃতির স্থানকে পূর্ণ করে এবং তারপর একে অপরের সাথে যোগাযোগ করে, যার ফলে যোগাযোগ বাধাগ্রস্ত হয় এবং বৃদ্ধির হার ধীরে ধীরে হ্রাস পায় বা এমনকি বন্ধ হয়ে যায়। উপ-সংস্কৃতির জন্য এটিকে নতুন সংস্কৃতির ফ্লাস্কে পুনরায় বীজ দেওয়া দরকার।
প্যাসেজিং (প্যাসেজ): প্রাথমিক কোষগুলিকে কালচার ফ্লাস্ক থেকে বের করে নেওয়া হয়, সেল সাসপেনশন প্রস্তুত করা হয় এবং আরও সংস্কৃতির জন্য দুই বা ততোধিক কালচার ফ্লাস্কে বিভক্ত করা হয়, যাকে সাবকালচার বলা হয়।
সেল লাইন: প্রাথমিক সংস্কৃতিতে প্রথম উত্তরণের পরে একটি কোষ লাইন হল একটি কোষ রেখা। যদি একটি কোষ রেখার বেঁচে থাকার সময় সীমিত হয়, তবে তাকে একটি সসীম কোষ রেখা বলা হয়। একটি কোষ রেখা যা সীমাহীন প্রজনন ক্ষমতা অর্জন করে এবং টিকে থাকতে থাকে তাকে অবিচ্ছিন্ন কোষ রেখা বা অসীম কোষ রেখা বলে।
কোষ রেখা: জৈবিকভাবে চিহ্নিত কোষ রেখা থেকে, একক কোষ বিচ্ছিন্নতা, সংস্কৃতি বা স্ক্রীনিং দ্বারা গঠিত কোষের জনসংখ্যাকে সেল লাইন বলে। বিভিন্ন আকারের কোষের জনসংখ্যাকে প্রাথমিক কোষ রেখা থেকে বিচ্ছিন্ন করা হয় এবং সাবক্লোন তৈরি করা হয়।
স্তন্যপায়ী কোষের সংস্কৃতির অবস্থা
বিভিন্ন স্তন্যপায়ী কোষের প্রতিটি পর্যায়ে মৌলিক সংস্কৃতির শর্ত প্রয়োজন
1. জীবাণুমুক্ত এবং অ-বিষাক্ত পরিবেশ: সংস্কৃতির মাধ্যম এবং সমস্ত সংস্কৃতি সরঞ্জামের অ্যাসেপটিক চিকিত্সা; সংস্কৃতি প্রক্রিয়া চলাকালীন দূষণ রোধ করতে সংস্কৃতি মাধ্যমে অ্যান্টিবায়োটিক যোগ করা; সংষ্কৃত কোষের ক্ষতি রোধ করতে বিপাক অপসারণের জন্য সংস্কৃতি মাধ্যমের নিয়মিত প্রতিস্থাপন।
2. পুষ্টি: তরল কৃত্রিম মাধ্যমের মধ্যে শর্করা, অ্যামিনো অ্যাসিড, বৃদ্ধি-উন্নয়নকারী উপাদান, জল, অজৈব লবণ, ট্রেস উপাদান ইত্যাদি থাকে। সাধারণত প্লাজমা এবং সিরামের মতো প্রাকৃতিক উপাদান যোগ করা প্রয়োজন।
3. উপযুক্ত তাপমাত্রা এবং pH মান: মানুষ এবং স্তন্যপায়ী কোষের জন্য সর্বোত্তম তাপমাত্রা হল 36±0.5 ডিগ্রি। উপযুক্ত pH মান হল 7৷{5}}.4.
4. গ্যাস পরিবেশ: গ্যাসের পরিবেশ সাধারণত "95 শতাংশ বায়ু এবং 5 শতাংশ কার্বন ডাই অক্সাইড" মিশ্রিত গ্যাস। অক্সিজেন সেলুলার বিপাকের জন্য প্রয়োজনীয় একটি গ্যাস, এবং কার্বন ডাই অক্সাইড মাধ্যমের pH বজায় রাখে।